Resumo:
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LEITE, S.N. Fototerapia como estímulo à cicatrização de úlceras cutâneas de
ratos nutridos e desnutridos. 2009, 123 f. Dissertação apresentada ao Programa
de Pós Graduação Interunidades Bioengenharia – Escola de Engenharia de São
Carlos, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Instituto de Química de São
Carlos da Universidade de São Paulo.
O estudo avaliou a influência de diversas formas de fototerapia na cicatrização de
úlceras cutâneas de ratos nutridos e desnutridos (desnutrição induzida). No 1°
experimento, de 60 ratos Wistar sob controle dietético, 30 foram selecionados
aleatoriamente, recebendo metade da dieta diária para indução de desnutrição
(marasmo), confirmada pela perda de massa corporal, sinais clínicos e dosagem de
albumina sérica. Os animais nutridos (N) e desnutridos (D) foram distribuídos em
grupos (n=10) conforme tratamento fototerápico, a saber: aparelhos desligados (LED
e laser - sham) e ligados (4 LED´s 660 nm e 32 LED´s 890 nm, 500 mW; e laser
HeNe 632,8 nm, 3 mW), sendo designados GNS, GNL, GNH, GDS, GDL e GDH,
respectivamente. Duas úlceras cutâneas foram realizadas com punch 8 mm e
irradiadas 3 vezes por semana durante 14 dias. Os programas LAS e Photoshop
foram utilizados para análise histológica (HE) da espessura da pele após o período
de desnutrição, e o ImageJ para análise das imagens e cálculo do índice de
cicatrização das úlceras no 7° e 14° dias, além da análise histológica (tricrômio de
Gomori) para avaliação da colagênese após desnutrição e no 14° pós-operatório. No
2° experimento 30 ratos receberam dieta controle e 30 receberam dieta
normoprotéica associada à proteína de baixa qualidade (gelatina) para induzir
desnutrição. A distribuição dos animais em grupos foi semelhante ao experimento 1,
porém utilizando o aparelho de laser de diodo (L1 660 nm e L2 808 nm, 100 mW),
sendo designados GNS, GNL1, GNL2, GDS, GDL1 e GDL2, respectivamente. A
confirmação da desnutrição, o procedimento cirúrgico, protocolo de tratamento e as
análises de imagens e histológicas seguiram a mesma metodologia do experimento
1. Os resultados do experimento 1 mostraram que após o período de desnutrição, a
espessura da derme dos animais desnutridos apresentou-se menor (p<0,0001) em
relação aos nutridos, assim como o percentual da colagênese (p<0,0005). No 7° dia
pós-operatório as úlceras do GDS apresentaram menores ICU´s em relação aos
GNS (p<0,01), GDL (p<0,001) e GDH (p<0,05). No 14° dia, as úlceras do GNS
apresentaram maiores ICU´s em relação aos GNH e GDS (p<0,05) e GDH (p<0,01),
assim como as do GDL em relação ao GDH (p<0,05). Histologicamente, o GDS
apresentou menor percentual de colágeno em relação ao GNS (p<0,05), GNH, GDL
e GDH (p<0,01). Os resultados do experimento 2 mostraram que após a
desnutrição, a espessura da derme dos animais desnutridos apresentou-se menor
(p<0,0001) em relação aos nutridos, assim como o percentual da colagênese
(p<0,03). No 7° dia, as úlceras do GDS apresentaram menores ICU´s em relação
aos demais grupos (p<0,001). No 14° dia não houve diferença entre os grupos
(p<0,05). Histologicamente, o GDS apresentou menor percentual de colágeno que
os demais grupos (p<0,001), e os grupos desnutridos tratados com laser
apresentaram maior percentual de colágeno que os demais grupos (p<0,001). Os
resultados evidenciaram a influência negativa da desnutrição na cicatrização, e que
as diversas formas de fototerapia apresentaram efeito bioestimulador na cicatrização
e colagênese nas úlceras cutâneas de ratos desnutridos em comparação à
cicatrização natural e fotoestimulada nos grupos nutridos.
Palavras-chave: Fototerapia; Cicatrização de Úlceras; Marasmo; Desnutrição
protéica; Processamento de imagens assistida por computador.
LEITE, S.N. Phototherapy as stimulus for healing of cutaneous wounds in
nourished and undernourished rats. 2009 123 f. Dissertação apresentada ao
Programa de Pós Graduação Interunidades Bioengenharia – Escola de Engenharia
de São Carlos, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Instituto de Química de
São Carlos da Universidade de São Paulo.
The study evaluated the influence of various forms of phototherapy in the healing of
cutaneous wounds in nourished and undernourished rats (induced malnutrition). In
the 1st experiment, from 60 rats under control diet, 30 were randomly selected to
receive half of the daily diet for induction of malnutrition (marasmus), confirmed by
loss of body weight, clinical signs and serum albumin. Nourished (N) and
undernourished (U) animals have been distributed into groups (n=10) according
phototherapic treatment, viz: off devices (LED and laser - sham) and on devices (4
LEDs 660nm, 32 LEDs 890nm, 500mW, and HeNe laser 632.8 nm, 3mW) and they
were designed GNS, GNL, GNH, GUS, GUL and GUH, respectively. Two 8mm
dorsal cutaneous wounds were punched and irradiated 3 times per week for 14 days.
LAS and Photoshop softwares were used for histological analysis (HE) of the skin
thickness after malnutrition time, and ImageJ ® for analysis of images to calculate
the wound healing rate in 7th and 14th days, besides the histological analysis (Gomori
trichrome) to calculate the colagenesis after the malnutrition time and in 14th post
operative day. In the 2nd experiment 30 rats have received control diet and 30
received normal protein diet associated of low quality protein (gelatin) to induce
malnutrition. The distribution of animals in groups was similar to experiment 1, but
using a diode laser device (L1 660nm and L2 808nm, 100mW) and they were
designed GNS, GNL1, GNL2, GDS, GDL1 and GDL2 respectively. The malnutrition
status, the surgical proceeding, the protocol for treatment and analysis of histological
images followed the same methods used in experiment 1. The results of experiment
1 showed that after malnutrition time, the thickness of the dermis in the
undernourished animals was lower (p<0.0001) than nourished even as the
percentage of collagenesis (p<0.0005). In the 7th post operative day the wound
healing rates were lower in the GUS than GNS (p<0.01), GUL (p<0.001) and GUH
(p<0.05). In the 14th day, the WHRs were higher in the GNS than GNH, GUS
(p<0.05) and GUH (p <0.01), even as the GUL than GUH (p<0.05 ). Histologically,
the GUS showed lower percentage of collagen than GNS (p<0.05), GNH, GUL and
GUH (p<0.01). In experiment 2, the results showed that after malnutrition time, the
thickness of the dermis of the undernourished animals was lower (p<0.0001) than
nourished, as well as the percentage of collagenesis (p<0.03). In the 7th day, the
WHRs were lower in the GUS than other groups (p<0.001). In 14th day there was no
difference between groups (p<0.05). Histologically, the GUS presented lower
percentage of collagen than the other groups (p<0.001), and the undernourished
group treated with laser presented higher percentage of collagen than other groups
(p<0.001).The results showed the negative influence of the malnutrition in the wound
healing and that the various kinds of phototherapy presented biostimulator effect in
the cutaneous wound healing and collagenesis in undernourished rats as compared
to natural and photostimulated healing in the nourished groups.
Key-Words: Phototherapy; Wound Healing; Marasmus, Protein Malnutrition; Image
processing computer assisted.
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